酵母双杂交技术原理和步骤

酵母双杂交技术原理：

建立真核生物转录激活因子的框架

利用GAL4捕获新蛋白质

试验流程：

构建诱饵质粒

将待筛选蛋白的cDNA序列与转录激活域融合

共转化细胞

已分离的DNA结合域和转录激活域不会相互作用

酵母双杂交系统技术步骤

1.

将待测基因与Gal4或LexA或其他合适蛋白的DNA结合域融合构建诱饵质粒;

2.

将诱饵质粒转化缺乏报告基因启动子的酵母细胞株中,选择被转化的酵母;

3.

再将文库质粒转化到酵母中;。