Western，也叫 Western blot, Western blot blot, Western印迹法，是检测蛋白质抗体的重要方法之一。
实验步骤：
1.用块称量。
2.用液氮，将组织块粉碎。
3.加入 RIPA缓冲剂(每克组织3 ml RIPA)、 PMSF (每克组织30μ l,10 mg/ml PMSF)，继续保持4℃的 Polytron (每克组织3 ml RIPA)。
4. PMSF (每克组织30μ l,10 mg/ml PMSF)，冰上孵化30分钟。
5.移入离心管，4℃大约20,000 g (15,000转)。
6.将上清作为细胞裂解液，分装-20℃保存。
7.蛋白质浓度测定采用 Bradford比色法。
8.取相同质量的细胞裂解液(体积*蛋白质浓度)，加2×电泳加样缓冲液。
9.用开水浴3分钟。
10.上样。
11.电泳(浓缩胶20 mA，分离胶35 mA)。
12.转膜仪转膜(100 mA 40分钟)。
13.薄膜为丽春红染色，胶用考马斯亮蓝染色。
14.显色 Westernblot试剂盒。
15.比较记录分析。
